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SPR分子互作动力学

SPR表面等离子共振技术 ,是检测分子互作及亲和力的主流技术 ,SPR无需进行分子标记 ,适用于各类生物体系的测定 :如测定蛋白质-小分子 、蛋白质-蛋白质 、蛋白质-核酸等的直接结合....
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       表面等离子共振(SPR, Surface Plasmon Resonance)是一种光学物理现象 。当偏振光以临界角入射到两种不同折射率的介质界面(比如玻璃表面的金或银镀层)时 ,可引起金属薄膜内自由电子的共振 ,使反射光在一定角度内大大减弱 。其中 ,使反射光在一定角度内完全消失的入射角称为SPR角 。可以通过监测生物反应过程中SPR角的动态变化 ,得到生物分子之间结合和相互作用的特异性信号 。

 

 
 
 

       利用SPR表面等离子共振这种特殊的物理现象 ,将一种生物分子(靶分子)偶联在生物传感器表面 ,再将含有另一种能与靶分子产生相互作用的生物分子(分析物)的溶液注入并流经传感器表面 。分子间的结合引起传感器表面质量增加 ,导致折射指数按同样的比例增强 ,生物分子间反应的变化即被监测到 。通过不同浓度梯度和温度梯度的分析物的注入 ,即可观察到分析物与靶分子的相互作用在分析物浓度或温度变化后引起的SPR角改变 ,进而可以绘制出两种分析物相互作用的SPR分子互作动力学曲线 ,计算出Kd 结合常数 。SPR分子互作动力学技术已经成为目前定性和定量监测两种不同分子间结合程度的标准方法 。

 

|   SPR分子互作仪器设备

    Biacore 8K :高通量与高质量互作数据兼得

1. 满足化药与生物治疗新药创制的高通量筛选表征平台

2. 高通量 ,16组检测通道 ,8根进样针平行分析

3. 60小时无人值守作业 ,4-40°C样品仓支持4块96/384孔板

4. 高灵敏度 ,<0.02RU低噪音水平 ,满足小分子量样品和超低偶联分析

5. 全新的ABA 、2D Kinetics模块 ,满足药物竞争抑制实验 、条件摸索和快速动力学表征 。

       Biacore 8K :高通量与高质量互作数据兼得

1. 满足化药与生物治疗新药创制的高通量筛选表征平台

2. 高通量 ,16组检测通道 ,8根进样针平行分析

3. 60小时无人值守作业 ,4-40°C样品仓支持4块96/384孔板

4. 高灵敏度 ,<0.02RU低噪音水平 ,满足小分子量样品和超低偶联分析

5. 全新的ABA 、2D Kinetics模块 ,满足药物竞争抑制实验 、条件摸索和快速动力学表征 。

 

 
 
 

|   SPR分子互作技术特点

1. 通过传感芯片可实时 、原位和动态监测生物分子间的相互作用过程 ,适用于各类生物体系的测定 ,小分子-蛋白质 ,蛋白质-蛋白质 ,DNA-蛋白质 ,DNA-DNA等;

2. 研究抗原-抗体特异性 、配体-受体相互作用 、蛋白复合物;

3. 样品无需标记 ,通过检测SPR角度变化 ,获得分析物的浓度 、亲和力 、动力学常数和特异性等信息;

4. 对复合物的定量测定不干扰反应的平衡 ,确保检测结果的稳定可靠性;

5. 实验设计方法灵活 ,提供高通量 、高质量的分析数据 。

|   SPR分子互作实验流程

 

|   相关文献

[1].  Li W, Kou J, Qin J, et al. NADPH levels affect cellular epigenetic state by inhibiting HDAC3-Ncor complex. Nat Metab,2021,3(1):75-89. 中国医学科学院基础医学研究所
[2].  Pan B W, Shi Y, Li W C, et al. Synthesis and biological evaluation of Vinpocetine derivatives. Bioorg Med Chem Lett,2020,30(2):126472. 北京大学
[3].  Shi R, Shan C, Duan X, et al. A human neutralizing antibody targets the receptor-binding site of SARS-CoV-2. Nature,2020,584(7819):120-124. 中科院微生物所
[4].  Shi Y, Pan B W, Li W C, et al. Synthesis and biological evaluation of Isosteviol derivatives as FXa inhibitors. Bioorg Med Chem Lett,2020,30(2):126585. 北京大学
[5].  Wang K, Sun Q, Zhong X, et al. Structural Mechanism for GSDMD Targeting by Autoprocessed Caspases in Pyroptosis. Cell,2020,180(5):941-955. 中科院生物物理所
[6].  Wang Q, Zhang Y, Wu L, et al. Structural and Functional Basis of SARS-CoV-2 Entry by Using Human ACE2. Cell,2020,181(4):894-904. 中科院微生物所
[7].  Yang J, Wang W, Chen Z, et al. A vaccine targeting the RBD of the S protein of SARS-CoV-2 induces protective  immunity. Nature,2020,586(7830):572-577. 四川大学
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