新闻资讯
新闻资讯
外泌体研究 :临床医生申请国自然的小窍门
- 分类 :腾博会官网视角
- 作者 :腾博会官网生物
- 来源 :
【概要描述】泌体 是一种30-150nm的细胞外囊泡 ,其在疾病标志物 、肿瘤微环境等研究领域中扮演着网红般的角色 。
外泌体研究 :临床医生申请国自然的小窍门
【概要描述】泌体 是一种30-150nm的细胞外囊泡 ,其在疾病标志物 、肿瘤微环境等研究领域中扮演着网红般的角色 。
- 分类 :腾博会官网视角
- 作者 :腾博会官网生物
- 来源 :
- 发布时间 :2022-05-19 13:57
- 访问量 :
外泌体 是一种30-150nm的细胞外囊泡 ,其在疾病标志物 、肿瘤微环境等研究领域中扮演着网红般的角色 。2018年 ,国家自然科学基金获批项目中 ,外泌体相关项目高达418项 ,资助金额达17642万元 ,相比2014年 ,增长近8倍 ,可谓异常火爆(图1) 。
图1 历年国自然资助外泌体项目统计数据
那么外泌体研究的基本思路是什么?
临床医生如何搭上外泌体这班快车 ,做点自己的小研究?
看惯了CNS系列的微信帖子 ,总感觉科研离临床医生很遥远...
正值2019年国自然申请之际 ,腾博会官网视角通过一篇经典的小文章为您倾情解读外泌体研究的小窍门 。
| 案例解析
适合普通临床医生的外泌体研究思路
| 开篇三连问
中国临床医生最大的优势是什么?样本 !
什么样本?血清/血浆 !
最想做的研究是什么?临床相关 !
有了上面三个问题的答案 ,我们想做和能做的研究基本有个轮廓了 。给大家介绍的这个案例 ,影响因子虽然不高(IF= 2.959) ,但饱含着智慧的光芒 。一起看看作者是如何开展研究的吧~
1. 关于样本
作者收集了108例结直肠癌(CRC)患者的血清样本(敲黑板 !☞病人平均随访时间是44个月 ,没有健康组哦)(表1) 。采用PEG富集的方法收集血清中的外泌体(超离更好 ,就是麻烦点) 。
表1 临床样本基线资料统计
2. 关于指标
作者从以前的研究结果中(也可以是别人的发表结果~)找出miR‐548c‐5p这个miRNA作为本次外泌体研究的指标 。原因很简单 ,miR‐548c‐5p这个miRNA在CRC患者中明显低于正常人群 ,因此 ,有理由相信在外泌体中 ,该miRNA有很大可能出现同样结果(把miRNA换成蛋白也很有意义哦) 。
为什么?
因为 ,有研究表明 ,血清/血浆中的miRNA约有70%以外泌体包裹的形式存在 ,所以无非是重复之前做的血清总miRNA的结果 。(...此处省略1万字)
3. 关于实验
没错 ,作者用最普通的RT-PCR的方式 ,对miR‐548c‐5p在不同样品中的表达量进行检测 ,最终发现肝转移的患者血清外泌体中的miR‐548c‐5p表达低于无肝转移的患者 ,而外泌体miR‐548c‐5p与有无血管浸润和淋巴结转移无明显相关性差异(图2)(肿瘤表型有很多 ,耐心分析总能找到一个与外泌体相关的) 。
图2 血清外泌体miR-548c-5p与肿瘤表型相关性分析
由于这些样品都有临床随访资料 ,因此 ,可以将miR‐548c‐5p做为CRC病人生存率的一个独立诊断指标 。Kaplan‐Meier生存曲线分析显示 ,血清外泌体miR‐548c‐5p表达量低的患者确实生存时间更短 ,P = 0.018 。(由此看来 ,临床样本之间也有PK ,关键要靠随访资料了 。)
图3 Kaplan‐Meier生存曲线分析
4. 关于外泌体功能
最后 ,作者不忘初心 ,回归到外泌体本身 ,画龙点睛 。外泌体是miR‐548c‐5p的转运形式 ,在CRC患者中 ,miR‐548c‐5p低表达 ,那么是否预示着miR‐548c‐5p有降低结直肠癌成瘤性的可能?
解决这个疑问的简单办法 ,就是加个细胞实验 。
作者选用经典的HTC116结直肠癌细胞系进行体外培养 ,将从高表达或低表达miR‐548c‐5p的CRC病人血清中分离的外泌体 ,加入HTC116细胞培养皿中进行共培养 ,CCK8实验发现 ,miR‐548c‐5p高表达的CRC病人外泌体可以显著抑制HTC116细胞的增殖(图4) 。
图4 CCK8细胞增殖实验检测
同时 ,荧光共聚焦显微镜下观察EdU染色的HTC116细胞 ,同样显示miR‐548c‐5p高表达外泌体能够显著抑制HTC116细胞的增殖(图5) ,自此为本研究画上一个圆满的小句号 。
图5 荧光共聚焦实验检测
| 结论与总结
看到如上的文献解读 ,临床医生朋友们是否觉得临床科研 ,尤其是外泌体科研非常的亲民 ,一点距离感都没有?
是的 ,只要医生朋友们平常注意收集典型样本(外泌体研究推荐血浆) ,遇到合适的时机 ,一篇有内涵的SCI文章离自己并不遥远 。
其实 ,在外泌体研究领域所发表的文献 ,无论影响因子多高 ,文献中的基本研究思路无外乎以下四步 :
如果您不具备外泌体实验的相关条件 ,只要您有想法和样品 ,您还可以借助腾博会官网生物的平台 ,实现自己的科研梦想 。
华盈生物是目前国内提供外泌体研究服务的标杆性企业 ,我们不仅自主研发了新型的EIQ3外泌体提取试剂盒 ,还打造了包括外泌体超速离心 、外泌体NTA分析 、外泌体透射电镜拍摄 、外泌体标志物蛋白Western Blot鉴定 、外泌体蛋白质谱分析 、外泌体分泌蛋白筛选 、外泌体microRNA筛选 、外泌体microRNA RT-PCR和数字PCR检测等一整套完整的服务平台 ,以帮助广大科研人员实现外泌体研究的美好诉求 。
地址 :上海市闵行区绿洲环路396弄5幢4层
电话 :400-869-2936 ,021-33968791
邮箱 :support@wayenbiotech.com
传真 :021-33938792
QQ :2120485725
战略合作
战略合作
| Full Moon | RayBiotech | CDI | IZON | Bio-Rad | R&D Systems | IsoPlexis | Akoya | 南模生物 | 欧易生物 | 上海实验动物研究中心 | 美吉生物 | 麦特绘谱 |
特别说明 :本网所有网页均为腾博会官网生物原创信息 ,转载必须征求腾博会官网生物同意 ,并同时注明本网名称及网址 。